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源北采用超声提取法提取

时间: 2025-08-15 07:35:15     来源: kingfund.fastseoul.com     作者: 新闻热点

  

目的法对采用HPLC法测定不同产地和不同生长年份北苍术[Atractylodeschinensis(DC.)Koidz.]中苍术素的含量。方法收集不同来源的不同北苍术样品,以甲醇为溶剂,源北采用超声提取法提取,苍术采用HPLC法测定苍术素的中苍含量,选用DiamonsilC18(250mm×4.6mm,术素5μL)色谱柱,含定流动相为甲醇-水(79∶21),量测检测波长为340nm,法对流速1mL/min,不同柱温25℃,源北进样量20μL。苍术结果苍术素的中苍线性范围为0.1875~0.6000mg/mL,方法精密度、术素重复性、含定稳定性良好;加样回收率为95.4%。不同产地北苍术中苍术素的含量为0.3232%~0.5959%,阿荣旗产北苍术饮片中苍术素含量最高。3年生、4年生、5年生苍术中苍术素的含量分别为:(0.3500±0.0048)%、(0.4550±0.0030)%、(0.3350±0.0118)%。结论本方法简便、快速、准确,适用于北苍术中苍术素的含量测定。

2015年版《中国药典》规定,苍术的来源有2种,分别是茅苍术(Atractylodeslancea(Thunb.)DC)和北苍术(Atractylodeschinensis(DC.)Koidz.)。茅苍术主要产于江苏、湖北、河南等省;北苍术主要产自内蒙古自治区、山西、黑龙江、吉林等省。研究表明苍术的主要化学成分为聚乙烯炔和倍半萜类化合物,具有抗癌、抑菌、抗病毒等药理作用,临床上常用于病毒性疾病的治疗。北苍术的原植物分布区域广泛,各地生境不尽相同,影响苍术中药材的质量。本研究建立了HPLC法,测定不同来源北苍术中苍术素的含量,现报道如下。

1仪器与试药

1.1仪器

Waters2695型液相色谱仪(沃特世科技有限公司),MDF-492型超低温冰箱(日本三洋公司),DFT200C型高速多功能粉碎机(永康市敏业工贸有限公司),CPX3800H-C型超声波清洗机(日本BRAN-SONIC公司),DHG-9240A型恒温鼓风干燥箱(常州市国旺仪器制造有限公司),PALL水纯化系统(美国PallCorporation公司),ML203T/02型十万级电子天平(瑞士梅特勒-托利多仪器有限公司),MDF-492型超低温冰箱(日本三洋公司)。

1.2试剂

甲醇(色谱纯,德国默克公司,批号:603-001-00-x),95%乙醇(天津福晨化学试剂厂,批号:20171110),石油醚(沸程60~90℃,天津福晨化学试剂厂,批号:20171201),苍术素标准品(中国食品药品检定研究院,批号:111924-201806)。

1.3药材

市售饮片的产地分别源于内蒙古自治区阿荣旗、赤峰、莫力达瓦达斡尔族自治旗(简称“莫旗”)、扎兰屯;3年生、4年生、5年生栽培北苍术根茎均采自于蒙古自治区莫力达瓦旗多热博热其勒村(简称“多热”),依次标记为1~7号。经齐齐哈尔医学院药学院王晓丽副教授鉴定为北苍术[Atractylodeschinensis(DC.)Koidz.]的根茎。

2方法与结果

2.1溶液制备方法

2.1.1对照品溶液

称取苍术素标准品适量,甲醇溶解,超声10min,制得20μg/mL的溶液,经0.45μm的微孔滤膜滤过,备用。

2.1.2供试品溶液

取“1.3”项下不同来源的北苍术饮片,粉碎后过三号筛,分别称取0.2g,置于具塞锥形瓶中,加入甲醇50mL,用封口膜密封后,称定重量,超声提取(功率250W,频率40KHz)1h,冷却至室温后,称定重量,用甲醇补足缺失的重量,用0.45μm过滤膜过滤,取续滤液,备用。

2.2色谱条件

DiamonsilC18色谱柱(4.6mm×250mm,5μL),流动相甲醇-水(79∶21)等度洗脱,流速1.0mL/min,检测波长340nm,进样量20μL。

2.3方法学考察

2.3.1线性关系考察

精密称取对照品60mg,甲醇定容至10mL,混匀,移取1mL至10mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度,标记为1号。从1号中吸取5mL溶液,用甲醇定容至刻度,标记为2号。以此类推,得3、4、5、6号溶液。按“2.1”项色谱条件下进行测定。以峰面积为纵坐标(Y),对照品浓度为横坐标(X)进行线性回归,得回归方程为Y=2715.1X-9.6694(r=0.9998),对照品浓度在0.01875~0.6000mg/mL范围内线性关系良好。

2.3.2精密度试验

吸取“2.1.2”项下供试品溶液20μL,按“2.2”项色谱条件,连续进样6次,测定峰面积,经计算RSD为0.49%,表明仪器精密度良好。

2.3.3重复性试验

吸取“2.1.1”项下对照溶液20μL,按“2.2”项下色谱条件,连续进样6次,测定苍术素峰面积,经计算RSD为1.79%,表明方法重复性良好。

2.3.4稳定性试验

吸取“2.1.1”项下供试品溶液20μL,按“2.2”项下色谱条件,分别在0、2、4、6、8、10h时进样,测定苍术素峰面积RSD为1.74%,表明供试品溶液在10h内稳定性良好。

2.3.5加样回收率试验

称取4号粉末0.1000g,共6份,分别加入“2.1.1”项下对照溶液5mL,置于50mL锥形瓶中,用甲醇定容至刻度,超声提取1h后过0.45μm微孔滤膜,取续滤液,按“2.2”项下色谱条件测定,计算回收率为95.4%,见表1。

1
2.4样品含量测定

分别称取1~7号苍术样品0.2g,每份药材制备3份平行样,按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液,按“22..22”项色谱条件测定,结果不同产地的苍术中苍术素的含量为0.3200%~0.5599%,阿荣旗饮片中苍术素含量最高。3年生、4年生、5年生苍术中苍术素的含量分别为:(0.3500±0.0048)%、(0.4550±0.0030)%、(0.3350±0.0118)%,见表2。2
3讨论

含量测定结果显示,4年生人工栽培北苍术的苍术素比3年生和5年生的含量高,以指标成分的含量为依据,本实验结果表明北苍术的最佳栽培时间为4年,与市售饮片相比,内蒙古莫旗的人工仿野生种植苍术中苍术素的含量符合标准。苍术中挥发性成分是主要活性成分,为特殊的次生代谢产物,其含量受遗传、个体发育和环境变化的影响。内蒙古自治区为温带大陆性气候,阿荣旗、莫旗、扎兰屯及多热地处内蒙古东部,位于大兴安岭东麓中段,气候呈现出春温、夏升、秋降、冬寒的特点,剧烈的温差有利于区域内北苍术体内物质积累。本方法简便、快速、准确,适用于北苍术中苍术素的含量测定。

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